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反相液相色譜柱操作步驟

更新時(shí)間:2022-08-16點(diǎn)擊次數(shù):2263
反相液相色譜柱操作步驟
1.使用新鮮潔凈的水與乙腈。沖洗系統(tǒng),確保系統(tǒng)干凈,不含任何緩沖鹽和污染物。
2.取用色譜柱時(shí)避免磕碰掉落。
3.將反相液相色譜柱入口端連接到系統(tǒng)上,柱出口端先不要連接,色譜柱身上有箭頭標(biāo)明正確流向。
4.在0.1 mL/min流速條件下用反相液相色譜柱,然后在2分鐘內(nèi)將流速升至0.5 mL/min。
5.當(dāng)溶劑均勻的從柱出口端流出,停流速,將反相液相色譜柱出口端接到系統(tǒng)檢測器上(這樣可以避免氣泡進(jìn)入檢測系統(tǒng),并且可快速達(dá)到基線平衡)。
6.重啟流速,按照步驟4的方法逐漸提高流速,至常規(guī)分析時(shí)所使用的流速。
7.參考柱效測試報(bào)告中的方法,使用該流動(dòng)相條件平衡反相液相色譜柱,通常需要使用5-10倍柱體積的流動(dòng)相,直至壓力與基線穩(wěn)定。
8.測試柱效。如果沒有柱效測試報(bào)告中的分析物,請沃特世化學(xué)消耗品部門尋求支持,使用合適的濃度與進(jìn)樣量。柱效結(jié)果略低于柱效測試報(bào)告屬正常情況。如結(jié)果明顯偏低、峰形拖尾,提示色譜柱和/或所使用的液相系統(tǒng)處于非理想狀態(tài),需要進(jìn)行故障排查。


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